《表1 引物序列:β-catenin与NF-κB信号通路在膝骨关节炎滑膜炎症中的表达特点及意义》

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《β-catenin与NF-κB信号通路在膝骨关节炎滑膜炎症中的表达特点及意义》


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取出试剂、引物及cDNA模板室温下解冻,将Talent荧光定量检测试剂盒(天根生化科技有限公司,FP209-01)中试剂按说明书配制反应体系,涡旋震荡混匀后分装至PCR专用96孔板各反应孔,最后加入cDNA模板及上下游引物,引物设计序列见表1,每个样品设3个复孔。将上样好的96孔板放置于荧光定量PCR仪中,设定反应条件:变性(95℃,5 s)-退火(60℃,10 s)-延伸(72℃,15 s)×40个循环,在最后一次循环中采集各组扩增曲线、溶解曲线及CT值,以相对定量法处理CT值数据。