《表1 NF-κB和β-actin内参基因引物序列》

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《电针阳陵泉等下合穴对急性胆囊炎豚鼠组织高迁移率族蛋白B1的影响》

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以RT-PCR法检测胆囊样本中NF-κB mRNA表达:首先提取组织总RNA，并进行琼脂糖凝胶电泳检测其的纯度，随后以此为模板进行c DN的A逆转录，合成第一条cDNA链，随后以1μL逆转录反应产物为模板，于冰上配置PCR反应体系:首先95℃预变性10 min，59℃退火/延伸50 s。扩增40个循环，于80℃采集熔解曲线，根据熔解曲线确定产物的纯度。当熔解曲线无杂峰时表示产物具备特异性，接下来校正目的基因Ct值并计算目的基因mRNA转录水平的差异。以β-肌动蛋白基因为内参，搜索目的基因的序列，运用Primer5软件设计、合成引物并设计引物序列，扩增引物见表1。