《表2 PCR引物序列:miR-140对早期骨关节炎软骨细胞衰老的调控作用及机制》

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《miR-140对早期骨关节炎软骨细胞衰老的调控作用及机制》


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Trizol法提取RNA,取0.2μl RNA溶液加入核酸蛋白定量仪中检测浓度及纯度,取1μg RNA使用VazymeHiScript II Q RT SuperMix for qPCR试剂盒按说明书逆转录为cDNA。引物序列由上海生工设计并合成(表2),用25μl体系在RT-PCR仪上进行反应,反应条件为95℃、5 min,40个循环(95℃10 s,60℃30 s,72℃30 s),95℃15 s,使用Bio-Rad CFX96荧光定量PCR仪进行检测,以β-actin为内参基因、2-△△CT相对定量法计算基因相对表达量。