《表1 引物序列：三磷酸腺苷对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响及机制研究》

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《三磷酸腺苷对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响及机制研究》

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取第3代BMSCs，接种于12孔板中，调整密度为3×105cells/mL，分为对照组、ATP组和成软骨诱导培养组，每组设置3个复孔，成软骨诱导培养组为阳性对照。待细胞贴壁生长后，分别使用普通培养基（含10%FBS的DMEM培养基）、ATP培养基（含10%FBS的DMEM培养基+ATP 300μmol/L）及成软骨诱导培养基（将含有10%小牛血清DMEM低糖完全培养基中加入0.05 mmol/L抗坏血酸、10 mmol/Lβ-磷酸甘油及100 nmol/L地塞米松即为成软骨诱导培养基）。培养3 d后收集各孔细胞，加入裂解液提取总RNA，进行反转录、PCR、2%琼脂糖凝胶电泳，采用Invitrogen凝胶成像系统进行成像分析（表1）。