《表1 合成引物序列：Elabela促进脐带华通胶间充质干细胞向心肌样细胞分化》

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《Elabela促进脐带华通胶间充质干细胞向心肌样细胞分化》

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诱导后7，14，21，28 d，采用TransZol UP试剂裂解各组细胞，按照试剂盒说明书提取各组细胞的总RNA。将提取的总RNA按照反转录试剂盒说明操作进行反转录反应，反转录出相对应的cDNA，再以c DNA为模板，根据q PCR试剂盒说明进行Real-Time PCR反应，总反应体系为20μL，扩增条件为94℃、30 s，循环1次；94℃、5 s，55℃、15 s，72℃、10 s，循环40次。使用iQ5仪器进行qPCR反应，记录数据，以GADPH为内参，根据CT值计算心肌特异性标志物Nkx2.5、cTnT、Connexin43 mRNA以及目的基因APJ mRNA表达水平，每个基因设置3个复孔。引物序列见表1。