《表1 qPCR引物序列：γ干扰素联合脂多糖诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化》

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《γ干扰素联合脂多糖诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化》

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用Trizol试剂提取间接共培养各组人脐带间充质干细胞的总RNA。按照反转录试剂盒说明书，取5.5μL总RNA，加入2μL 5×的PrimeScript Buffer，2μL Random 6 mers和0.5μL PrimeScript RT Enzyme Mix，反转录出c DNA用于检测Toll样受体2，3，4 mRNA的表达水平。按照实时荧光定量PCR试剂盒说明书，以GAPDH为内参照，反应体系为（20μL体系）上游引物0.8μL、下游引物0.8μL、ROX Reference DyeⅡ（50×）0.4μL、TB Green Premix Ex TaqⅡ（Tli RNaseH Plus）（2×）10μL、灭菌水6μL、cDNA 2μL。应用Applied Biosystems 7500/7500Fast Real-Time PCR System仪器进行PCR反应及结果分析。以2-??Ct来计算Toll样受体2，3，4的相对表达水平。引物序列见表1[8]。