《表1 引物序列一览表：不同运动对生长期大鼠Wnt/β-catenin信号及软骨内成骨的影响》

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《不同运动对生长期大鼠Wnt/β-catenin信号及软骨内成骨的影响》

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取生长板软骨放入液氮预冷过的研钵研磨，提取RNA反转录为cDNA，用SYBR荧光定量对Wnt/β-catenin信号及下游基因进行检测，引物（见表1）由Primer Premier 5软件设计，由博尚生物科技有限公司合成。加裂解液研磨，然后移入1.5EP管中冰上放15 min；4℃离心10 min，取上清，加入等体积loading buffer100℃解构，跑胶转膜，用丽春红染带，剪膜标记目的蛋白，放入暗盒用5%的脱脂奶粉封闭1 h，然后加入目的蛋白一抗4℃过夜，用PBST洗5 min/3遍，加入相应的二抗2 h，再用PBST洗15 min/3遍，最后扫膜，用ImageJ软件进行灰度值分析。抗体分别购于abcam和CST公司。