《表1 引物序列:复肾功方对慢性肾衰竭大鼠Wnt/β-catenin信号途径的影响》

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《复肾功方对慢性肾衰竭大鼠Wnt/β-catenin信号途径的影响》


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用trizol试剂提取所需总RNA,测取每份样品RNA浓度,并稀释到250 mg·L-1,定总RNA浓度为500 ng,分别取每份稀释后样品2μL,配上额定的水和逆转录试剂后进行RNA逆转录。逆转录后检测DNA浓度,确定合格后再向八连管中加入DNA 1μL及混合物,加盖混匀。PCR反应体系10μL,反应条件95℃30 s预变性;95℃5 s,60℃30 s扩增,39个循环;65℃5 s,95℃0.05 s熔解,采用2-ΔΔCt法表示各组m RNA表达量。PCR引物由南京金斯瑞生物科技有限公司合成,引物序列见表1。