《表1 PCR引物表：不同代次大鼠骨髓间充质干细胞Wnt/β-catenin信号通路表达分析》

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《不同代次大鼠骨髓间充质干细胞Wnt/β-catenin信号通路表达分析》

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采用Realtime-PCR法检测不同代次MSCs中成纤维细胞分子标记Wimentin、TCF、α-SMA的表达。按试剂盒说明书提取MSCs细胞RNA，检测RNA的含量和纯度（OD 260/280），-70℃保存待用。PCR过程:采用软件Primer Express设计引物（表1），探针5'端标记FAM，3'端标记。采用一步法分别扩增各目的片段。10μL PCR反应体系，反应条件:56℃10 min，95℃变性2 min，95℃15 s，62℃45 s，42个循环，28℃5 min。在62℃退火阶段检测荧光信号，FAM通道检测荧光，CT值≤38判定为阳性。