《表1 SOST、Wnt5a、β-catenin的引物序列》

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《补肾舒脊颗粒对hBMSC软骨内成骨过程中Wnt/β-catenin信号通路的影响》

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4.2荧光定量PCR测定细胞中SOST、Wnt5a、β-catenin m RNA表达各组细胞培养28d后，Trizol法提取各组细胞总RNA。测定RNA浓度后取1μg总RNA，用逆转录试剂盒合成c DNA，反转录体系为:4μL 5×iscript reaction mix、1μL iscript reverse transcriptase、1μg RNA、补无核酸水至20μL。以1μL c DNA为模板按Power SYBR Green PCR Master Mix试剂盒说明书配制成25μL的real-time PCR反应体系，引物序列见表1，反应条件为:95℃，5min；95℃，15s，60℃，1min，40个循环。2-△△Ct法计算SOST、wnt5a、β-catenin的相对表达量。每组样品做3个复孔，计算时取平均值。重复3次。