《表1 PCR引物序列：山豆根醇提取物干预TGF-β_1/Smad通路抑制兔耳增生性瘢痕的机制》

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《山豆根醇提取物干预TGF-β_1/Smad通路抑制兔耳增生性瘢痕的机制》

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采用trizol方法提取各组组织样本总RNA，采用DNA酶除去DNA影响后，逆转录试剂盒合成cDNA。加入合成的PCR引物，对兔耳瘢痕组织中特定的基因序列进行RT-PCR扩增。引物序列见表1，由生工生物工程（上海）有限公司合成。PCR扩增条件为：94℃预变性13 min，然后按94℃30 s，55℃30 s，72℃30 s进行32个循环，最后72℃延伸8 min。根据扩增片段进行2%琼脂糖电泳，应用凝胶自动成像仪拍照，采用Image J软件测定目的条带灰度值进行分析，以获得目的基因TGF-β1和Smad3与内参基因β-actin的条带灰度比值来表示目的基因相对表达量。