《表1 引物序列：TGF-β1/Smads通路参与内皮–间质转分化在低氧高二氧化碳性肺动脉高压中的调控作用》

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《TGF-β1/Smads通路参与内皮–间质转分化在低氧高二氧化碳性肺动脉高压中的调控作用》

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取出造模完毕的RPAECs，加入TRIzol试剂，按试剂说明书进行总RNA的提取。收集总RNA沉淀，加入20μL DEPC水溶解，并从中取出1μL进行总RNA浓度测定，按照逆转录试剂盒说明书逆转录合成c DNA。CD31引物由日本Ta Ka Ra公司合成，其余引物由上海捷瑞生物工程有限公司合成，引物序列见表1。PCR扩增条件:94°C预变性3 min；94°C变性30 s；64.5°C（CD31）/54°C（α-SMA）/52°C（TGF-β1）/54°C（Smad2/3）/60°C（GAPDH）30 s（退火，32个循环）；72°C延伸1 min；72°C终止延伸5 min。在恒压100 V条件下，将获得的cDNA进行电泳，时间为30～40 min，上样量为5μL。电泳结束后曝光成像。用Image J软件分析各组电泳条带，用目的基因与GAPDH基因灰度值之比表示目的基因的表达水平，实验重复3次。