《表1 引物序列:microRNA-146在甲亢性心脏病中的调控作用》

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《microRNA-146在甲亢性心脏病中的调控作用》


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2-ΔΔct法计算miR-146a和miR-146b相对表达。

RNA提取和cDNA合成:取心组织按Trizol法提取RNA,用分光光度仪(Nanodrop-2000机器)检测RNA纯度和浓度,取1 ug RNA进行逆转录反应,合成cDNA稀释10倍。实时荧光定量PCR:20 uL体系:SYBRTMGREEN Master Mix 10 u L,无酶水7 uL,cDNA 1.4 u L,上游引物0.8 u L,下游引物0.8 uL。反应条件:50°C 20 s、95°C 10 min预变性,95°C 15 s和60°C 60 s 40个循环(ABI 7500 fast机器)。引物由Invitrogen公司合成(表1)。以U6内参,利用