《表1 基因引物序列:炎性小体活化在肝脏衰老中的作用》

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《炎性小体活化在肝脏衰老中的作用》


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用Trizol(Sigma-Aldrich)裂解肝组织,提取组织RNA并测量浓度。根据逆转录试剂盒(Takara Bio)操作书说明进行逆转录。取c DNA模板2μL与前后引物各0.8μL加至实时定量PCR反应液(总体积20μL)中进行实时定量PCR。经95℃变性60 s后进入PCR扩增循环,具体参数为95℃15 s、60℃60 s、72℃45 s×40个循环。扩增结果采用实时荧光定量PCR分析程序(Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR)测ct值(目的基因与内标GAPDH比较),计算其相应2-△△ct值。用目的基因拷贝数表示目的基因m RNA相对表达量。见表1。