《表1 引物序列：SIRT1及炎性细胞因子在不同抗结核药物致肝损伤中的作用》

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《SIRT1及炎性细胞因子在不同抗结核药物致肝损伤中的作用》

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采用实时PCR方法测定，严格按照试剂盒说明书进行操作。收集各组处理后的细胞用Trizol提取RNA，mRNA表达水平检测以GAPDH为内参，采用2-ΔΔCT计算mRNA表达水平；酶标仪检测各组RNA样本吸光度，OD260/OD280在1.8～2.0范围内提示RNA纯度较好。取RNA在逆转录酶的作用下合成c DNA。用SYBR Green嵌合荧光法进行实时PCR扩增。反转录条件为37℃15 min，85℃5 s，4℃1 min。定量PCR反应条件为95℃预变性30 s，95℃变性5 s，60℃退火30 s，72℃延伸60 s，共40个循环，引物由上海生物工程公司负责设计与合成，引物序列见表1。