《表1 引物序列:STAT5A及NANOG基因mRNA在前列腺癌细胞雄激素非依赖性转化中的表达及作用》

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《STAT5A及NANOG基因mRNA在前列腺癌细胞雄激素非依赖性转化中的表达及作用》


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收集细胞,通过Trizol法提取细胞中的总RNA,反转录合成模板cDNA。按模板cDNA 1μl,上游引物、下游引物各1.5μl,SYBR GreenPCR Mastr mix 10μl,RNase-free H2O 6μl配置,总反应体系为20μl。反应条件为95℃15 min,95℃10 s,58℃40 s,40个循环。每个mRNA重复测定2次,取平均值进行整理和比较分析。计算方法:以GAPDH为内参基因,△Ct=Ct(目的基因)-Ct(内参基因),△△Ct=△Ct(LNCaP-AI)-△Ct(LNCaP)。目的基因的引物序列见表1。