《表1 qPCR引物序列:PLA3基因在ABA调控水稻种子萌发中的作用》

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《PLA3基因在ABA调控水稻种子萌发中的作用》


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分别取吸胀24 h的pla3-C和WT的胚,置于液氮中保存。利用Trizol法提取RNA,用TOYOBO的qPCR RT Master Mix with gDNA Remover试剂盒将RNA反转录为cDNA。以cDNA为模板进行普通PCR鉴定反应,并将PCR产物测序,确保所取样品为WT或pla3-C。再以cDNA为模板进行qPCR反应,引物序列如表1所示,试剂为Vazyme的2×SYBR Green qPCR Master Mix。以OsACTIN的表达量为分子内标,计算基因的相对表达量(图4和6),再对比较同种材料在ABA处理时基因的表达量与蒸馏水处理时基因的表达量的比值变化(图7)。