《表1 qPCR引物序列:Vimentin和E-cadherin蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义》

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《Vimentin和E-cadherin蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义》


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取液氮冻存的乳腺癌组织1 g/例,液氮研碎后提取总RNA。将其稀释至500 ng/ml,用逆转录试剂盒进行反转录,获得的cDNA作为模板,扩增Vimentin和E-cadherin mRNA及内参,引物序列见表1。反应条件为94℃4 min,之后94℃20 s、60℃30 s、72℃30 s,进行35个循环。其中在72℃30 s阶段中获取数据进行熔解曲线分析,反应结束后由仪器自带软件计算出Ct值并给出定量结果。基因相对表达量F=2-△△Ct。