《表1 各引物序列：LncRNA-GAS5和miR-103在浸润性乳腺癌中的表达关系及意义》

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《LncRNA-GAS5和miR-103在浸润性乳腺癌中的表达关系及意义》

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采用qRT-PCR法测定组织LncRNA-GAS5、miR-103相对表达量，乳腺癌组织及癌旁组织标本研成粉末，加入Trizol试剂提取总RNA，确定RNA含量及纯度满意后采用SusperScript First Strand cDNA系统逆转录RNA，反应体系:H2O 4.16μl+反转录缓冲液1.5μl+反转录酶1μl+抑制剂0.19μl+三磷酸碱基脱氧核苷酸（dNTPs）0.15μl+LncRNA-GAS5/miR103特异性引物3μl+总RNA 5μl，反应条件:16℃30min，42℃30 min，85℃5 min，4℃低温保存，RNA反转录合成cDNA后，在PRISM 7500型RT-PCR系统上进行PCR扩增，miR-103表达定量分析以U6为内参，LncRNA-GAS5表达定量分析以GAPDH为内参，各引物序列见表1；miR103 PCR扩增反应体系:10μl Mater Mix+7.2μl去离子水+上下游引物各0.4μl+2μl cDNA，反应条件:95℃预变性10 min，95℃15 s，60℃60 s退火延伸，共50个循环。LncRNA-GAS5PCR扩增反应体系:10μl SYBR Premix Ex Taq+ROX Reference Dye 0.4μl+10 ng cDNA+ddH2O补足20μl，反应条件:95℃预变性10 min，95℃15 s，72℃15s退火延伸，共40个循环。组织miR-103/LncRNA-GAS5相对表达量RQ=2-△△CT[5]。并收集所有病例的临床病理资料，分析miR-103、LncRNA-GAS5表达与临床病理参数的关系。