《表1 引物序列表:miR-188-5p在乳腺癌组织中的表达及意义》

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《miR-188-5p在乳腺癌组织中的表达及意义》


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miR-188-5p和内参U2引物由北京博迈斯科技发展有限公司设计与合成,序列见表1。取50 mg组织标本,液氮中研磨后,PBS洗涤标本2次,加入1 mL Trizo按照说明书完成总RNA的提取,使用逆转录试剂盒反转录出cDNA第一链。miR-188-5p表达使用SYBR Green荧光染料相对定量法检测,按照试剂盒说明书操作,取10μgcDNA后加入试剂盒中的相关试剂,上机检测,扩增条件:95℃预变性5 min;然后95℃15 s,60℃40 s 40个循环;最后72℃延伸10min。仪器自带软件实时监控荧光变化,对照内参分析熔解曲线,用2-△△Ct表示目的基因的表达水平。