《表1 PCR引物序列：Siva-1在胃癌组织中的表达及其临床意义》

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《Siva-1在胃癌组织中的表达及其临床意义》

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采用q RT-PCR检测胃癌及癌旁组织中Siva-1 m RNA相对表达量。在液氮中研磨组织，按Trizol说明书提取组织总RNA后，利用Thermo Bio Mate 3S紫外/可见光分光光度仪测定RNA纯度（OD值）和蛋白质浓度。OD260/OD280范围为1.8～2.1。按q RT-PCR试剂盒说明书进行逆转录，得到c DNA。反应参数为：16℃、30 min，42℃、30 min，90℃、5 min。反应结束后短暂离心，置于冰上冷却。然后进行RT-PCR扩增反应，95℃预变性10 min，95℃变性15 s，60℃退火1 min，70℃延伸30 s，共40个循环。PCR引物设计合成由上海吉凯基因公司完成（见表1）。采用2-△△ct法测定目标基因m RNA相对表达量，用Data Assist (V3.01）软件进行结果分析。