《表1 PCR引物序列:miR-92b在子痫前期患者中的表达和意义》

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《miR-92b在子痫前期患者中的表达和意义》


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使用TRIzol试剂提取研究组(n=60)和对照组(n=60)孕妇血清、对照组(n=6)和缺氧组(n=6)细胞总RNA,随后用75%乙醇代替异丙醇进行RNA沉淀。使用NanoDrop 1000分光光度计测定RNA质量。以DBI Bestar qPCR RT试剂盒(DBI Bioscience,Ludwigshafen,德国)将总共1μg RNA反转录成cDNA。使用7500 Fast Real-Time PCR仪进行RT-PCR,检测血清和细胞中miR-92b的表达。20μl PCR反应包括1μl逆转录产物(1∶5),上下游引物各0.5μl和10μl DBI-2043Bestar实时PCR主混合物。引物序列见表1。将反应物在96孔光板中于94℃温育2 min,然后进行94℃20 s,8℃20 s和72℃20 s的40个循环。使用2-ΔΔCt公式对miRNA进行定量。