《表1 引物序列列表:食管癌血浆miR-92a的表达及临床诊疗意义》

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《食管癌血浆miR-92a的表达及临床诊疗意义》


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本研究结合MicroRNA.org、Microcosm、DI-ANA-MICROT、miRDB和TARBASE等靶基因生物信息学预测软件预测结果显示,miR-92a可以通过与BCL2L11基因3’UTR区域结合进而调控BCL2L11基因表达。Niu等研究结合荧光素酶报告基因和体内外干预检测结果显示miR-92a能够直接靶向负调控BCL2L11表达,进而调节肿瘤细胞凋亡[5]。然而,ECa血浆内是否存在miR-92a靶向负调控BCL2L11尚不清楚。首先,利用M-MLV逆转录试剂盒(promega)制备总RNA的cDNA模板。然后,在ABI 7300型定量PCR仪上,应用miScript SYBR Green PCR试剂盒(QIAGEN)进行实时qRT-PCR检测。PCR反应条件与miR-92a茎环qRT-PCR反应条件相同。以18S rRNA为内参,2△△CTmean±SEM计算靶基因BCL2L11相对表达量,实验重复3次,引物序列见表1。