《表1 检测基因引物序列：伪基因和长链非编码RNA在肾透明细胞癌患者血浆中的表达与临床意义》

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《伪基因和长链非编码RNA在肾透明细胞癌患者血浆中的表达与临床意义》

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选择5S RNA作为内参，参考qRT-PCR试剂盒说明书加样，取3～4个复孔。采用2-ΔΔCt计算目的基因的相对表达量。引物序列见表1。血浆qRT-PCR反应体系如下:SYBR Green预混液5μL，上、下游引物各0.5μL，c DNA模板1μL，双蒸水3μL。反应程序:95℃1 min，95℃10 s，60℃30 s，共40个循环。细胞qRT-PCR反应体系如下:SYBR Green预混液10μL，ROX参比染料0.5μL，上、下游引物各0.5μL，c DNA模板1μL，双蒸水7.5μL。反应程序:95℃30 s，95℃10 s，60℃30 s，共40个循环；熔解曲线反应条件均设为95℃15 s，60℃60 s，95℃15 s；通过熔解曲线评估引物的特异性。