《表1 引物序列:联合检测被转化生长因子b激活的长链非编码RNA和糖链抗原19-9对胰腺癌的诊断和预后价值》

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《联合检测被转化生长因子b激活的长链非编码RNA和糖链抗原19-9对胰腺癌的诊断和预后价值》


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抽取观察组和良性组病人治疗前、健康组体检当日清晨空腹静脉血4 m L,3 000 r/min离心取上清液。采用电化学发光法(雅培I2000化学发光仪)检测血清CA19-9,正常参考值范围<39 U/m L。采用TRIzol试剂盒(Invitogen,Carlsbad,CA,USA)提取总RNA。使用转录子第一链c DNA合成试剂盒(德国罗氏)将总RNA(1μg)用序列特异性引物或锚定寡聚(d T)18引物和随机六聚体引物逆转录成互补c D-NA。采用实时定量PCR(q RT-PCR),以β-肌动蛋白水平作为正常化对照检测lnc RNA-ATB的相对表达量。引物序列见表1。反应条件如下:95℃预变性10 min,95℃变性10 s,60℃退火,延伸1 min,40个循环。用2-ΔΔCt法计算lnc RNA-ATB的相对表达量。