《表2 挑选长链非编码RNA双向引物序列表》

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《LncRNA与凋亡相关基因在小鼠肠缺血再灌后肠黏膜表达谱中的变化及共表达网络关系》


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采用Primer 5.0软件设计上/下调最明显的6个差异长链非编码RNA的引物(表2),并由Invitrogen公司合成。按前述方法提取两组各6个样品的RNA,配制退火混合物,混合液在65℃水浴5 min,冰上放置2 min。12 000×g短暂离心后,在离心管中依次加入Reverse Transcriptase反应液,混合后37℃恒温1 min,50℃温育60 min,70℃温育15 min使酶失活,置冰浴待用或-20℃保存。将所有cDNA样品分别配置Realtime PCR反应体系,12 000×g短暂离心。将8μL混合液加到384-PCR板对应的每个孔中,再加入对应的2μL cDNA,小心粘上Sealing Film封口膜,并短暂离心混合置于冰上,最后置于Realtime PCR仪上进行PCR反应。