《表1 引物序列:PLAG1转基因小鼠中差异表达长链非编码RNA的筛选分析》

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《PLAG1转基因小鼠中差异表达长链非编码RNA的筛选分析》


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提取各组织总RNA后,经反转录和PCR反应检测其表达水平。引物序列如表1所示。采用SYBR Pre-mix Ex TaqⅡ试剂盒,应用实时定量PCR扩增仪(ABI 7500),检测每个扩增循环后SYBR Green荧光信号水平。反应体系共10μL:上、下游引物各0.5μL,cDNA 2μL,ddH2O 2μL,2X Master Mix 5μL。反应条件:95℃预变性10 min,95℃、10 s,60℃、1 min,共40个循环。收集荧光信号,建立溶解曲线,运用溶解曲线检测扩增产物纯度。采用相对定量的2-ΔΔCT法获得的CT值进行分析。