《表1 引物名称和序列:长链非编码RNA PRNCR1对非小细胞肺癌A549细胞迁移和凋亡的影响》

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《长链非编码RNA PRNCR1对非小细胞肺癌A549细胞迁移和凋亡的影响》


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三组细胞在融合率达80%以上后,用0.25%胰蛋白酶消化后放入15 ml离心管,加入1 ml的TR-Izol RNAiso,裂解细胞,提取RNA后根据TaKaRa逆转录试剂盒的说明书进行试验,将逆转录的cDNA保存在4℃冰箱中备用。根据TaKaRa荧光定量PCR试剂盒的说明书的要求,采用20μl的反应体系,加入各样品。进行荧光定量PCR的检测。采用FS2000系统对PCR进行分析,反应条件预设为预变性95℃30 s;95℃5 s;60℃30 s,40个循环。溶解曲线:95℃5 s;60℃1 min。降温:50℃30 s,1个循环。内参基因GAPDH和lncRNA PRNCR1引物由上海生工公司生产(见表1)。采用2-ΔΔCt的方法计算目的基因的相对表达量。