《表1 引物序列:山奈酚通过调控miR21抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖的研究》

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《山奈酚通过调控miR21抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖的研究》


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取对数生长期细胞,以每孔6×105个接种于6孔培养板中,设对照组和KA给药组(30,90μmol·L-1),每组3个复孔。培养24 h后,KA给药组加入终浓度为30,90μmol·L-1的KA药物干预作用,对照组给予同体积的培养基,置于37℃、5%CO2培养箱中培养24 h。运用RNA提取试剂盒提取A549细胞中的RNA,逆转录酶将RNA逆转录成cDNA后运用qPCR检测miR21及m RNA的表达水平。PCR扩增条件(反应体系为10μL):95℃预变性2 min;95℃变性10 s,62℃退火30 s;72℃延伸15 s,共40个循环,以β-actin为内参,采用2-(35)(35)Ct法计算相关基因m RNA的相对表达量。引物序列见表1。