《表1 引物序列:miR-374b及其靶基因Myf6调控成肌细胞增殖分化的研究》

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《miR-374b及其靶基因Myf6调控成肌细胞增殖分化的研究》


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采用Trizol提取不同分化时期细胞总RNA,采用核酸蛋白分析仪(Eppendorf)测量RNA浓度,Myf6、MyHC、MyoG、MyoD基因按照罗氏反转录试剂盒进行操作,取cDNA进行qRT-PCR,GAPDH基因为内参。反应程序:95℃预变性3 min,95℃变性10 s,60℃退火20 s,72℃延伸20 s,40个循环。miR-374b按照microRNA逆转录试剂盒使用说明书进行,以5sRNA为内参,反应程序:95℃预变性3 min;PCR反应95℃12 s,62℃40 s,共40个循环,62℃时采集荧光信息。采用2-ΔΔCt计算进行单因素方差分析,引物序列见表1。