《表1 引物序列:槲皮素通过G4调控癌基因表达影响肿瘤细胞增殖与凋亡》

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《槲皮素通过G4调控癌基因表达影响肿瘤细胞增殖与凋亡》


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将生长状态良好的Hep-2和MCF-7细胞接种到6孔培养板中。经过夜培养后,用不同浓度的槲皮素(0、50μmol/L、100μmol/L)进行处理。处理72 h后,吸去培养液,用PBS洗涤1次,参照RNAiso Plus说明书提取总RNA。取500 ng的总RNA,用Prime Script?RT Master Mix试剂盒反转录成c DNA。参照SYBR?Premix Ex Taq TM II说明书配制20μL反应体系,每个样品设置3个重复,以β-actin作为内参,然后按照标准程序进行实时定量PCR反应。使用BioRad CFX Manager V1.1.308.1111软件采用ΔΔCT法进行实验数据分析。将阴性对照组的mRNA表达量设定为1,计算各个靶基因的相对表达量。实验至少重复3次,所用引物序列见表1。