《表1 引物序列:白茶水提物通过诱导凋亡抑制肝癌细胞BEL-7402增殖》

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《白茶水提物通过诱导凋亡抑制肝癌细胞BEL-7402增殖》


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采用Real-time PCR检测细胞内与凋亡相关基因的表达情况。具体操作如下:首先用预冷的PBS洗涤细胞3遍,尽量去除残留的PBS后加入TRIzoL裂解细胞并收集样品,按照试剂盒说明书提取总RNA,再用DNA酶去除残留的基因组DNA,采用多功能酶标检测样品的OD260∶OD280,分析RNA纯度后,取2μg的总RNA用于反转录合成第一链cDNA (cDNA第一链合成试剂盒为Fermentas公司生产,具体操作按照试剂盒说明书)。然后各取1μL cDNA为模板,进行Realtime PCR定量分析细胞内p53和p21表达水平,所用引物序列如表1(根据GenBank所提供的各基因的CDNA序列设计),内参为GAPDH。