《表1 引物序列:盐霉素通过靶向调控ALDH影响三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡》

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《盐霉素通过靶向调控ALDH影响三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡》


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Sal作用48 h后,取各组对数生长期MDA-MB-231细胞,Trizol试剂盒提取总RNA,测定260/280 nm OD值,确定RNA纯度及浓度。按反转录试剂盒反转录获得相应的cDNA。以GAPDH为内参。实时荧光PCR反应混合液共20μL,反应条件:95℃反应5 min预变性;95℃反应20 s,58℃反应20 s,72℃反应20 s,72℃反应10 min,共40个循环,并采用2-ΔΔCt法计算目的基因mRNA的相对表达量。引物序列见表1。实验至少重复3次。