《表1 引物序列信息：微小RNA-92a-3p靶向PTEN调控胰腺癌细胞增殖和转移》

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《微小RNA-92a-3p靶向PTEN调控胰腺癌细胞增殖和转移》

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RT：反转引物；F：正向引物；R：反向引物

收集对数生长期的HPDE6-C7，Panc-1，BxPC-3，AsPC-1，MIA Paca-2和Capan-2等细胞，采用TRIzol法分别提取细胞总RNA，检测其浓度和纯度。使用U6-R与miR-92a-3p反转（RT）引物分别进行反转录，获得c DNA。遵照SYBR green qPCR检测试剂盒步骤进行操作，反应体系如下：SYBR green q PCR mix（2×）10μL；正向引物0.4μL；反向引物0.4μL；模板cDNA 2μL；去离子水7.2μL。反应条件如下：95℃，5 min；95℃预变性5 min，95℃变性20 s，60℃延伸20 s，循环40次，60℃升温至95℃，升温速度1℃/15 s。以U6为内参，使用2-ΔΔCt的方法计算相对表达水平，ΔCt为miR-92a-3p的Ct值减去U6的Ct值，ΔΔCt为PC细胞ΔCt减去HPDE6-C7细胞的ΔCt。引物序列信息见下表1。