《表1 各引物序列信息:hsa-miR-500a-3p对前列腺癌早期诊断及病程判断的作用》

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《hsa-miR-500a-3p对前列腺癌早期诊断及病程判断的作用》


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按照ABI公司的Taq Man.Micro RNA Reverse Transcription kit试剂盒操作说明书,对抽提的RNA进行体外反转录实验,得到c DNA产物;反应条件为:16°C,孵育30 min,42°C孵育30 min,85°C加热5 min,4°C保存。以得到的c DNA为模版,进行荧光定量PCR,采用Taq Man.Universal PCR Master Mix20μl反应体系,在罗氏Light Cycler480仪器上操作,以U6作为表达检测的内参,ΔCT表示mi R-500a-3p的相对表达,其中ΔCT=|CTU6-CTmi R-500a-3p|,反应条件为:95°C,预变性10 min;95°C 15 s,60°C 30 s,70°C 30 s进行40个循环的扩增,引物信息见表1。