《表1 qPCR引物序列:微小RNA-151a-3p靶向调控Tp53及对胰腺癌细胞侵袭、迁移的影响》

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《微小RNA-151a-3p靶向调控Tp53及对胰腺癌细胞侵袭、迁移的影响》


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注:F:上游引物;R:下游引物

取转染48 h后的细胞采用TRIzol试剂提取总RNA,以总RNA为模板使用PrimeScriptTMOne Step RT-PCR Kit进行qPCR,反应体系:总RNA 2μl、2×One Step RT-PCR BufferⅢ12.5μl、TaKaRa Ex Taq HS(5 U/μl)0.5μl、PrimeScript RT enzyme MixⅡ0.5μl以及上下游引物各0.5μl,RNase-free dH2O补齐。反应条件:反转录反应(42℃5 min、95℃10 s);95℃5 s,60℃30s,40个循环。采用2-ΔΔCt表示miR-151a-3p较U6或目标基因较GAPDH的相对表达量。见表1。