《表1 引物序列:miR-125a-5p对卵巢癌细胞的增殖迁移和侵袭能力的影响》

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《miR-125a-5p对卵巢癌细胞的增殖迁移和侵袭能力的影响》


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细胞总RNA提取按照TRIzol说明书进行,用Nanodrop 2000微量分光光度计检测A260和A280,计算纯度和含量;使用MirXTMmiRNA qRT-PCR TB GreenTMKit检测miR-125a-5p的表达水平,使用PrimeScriptTMRT Master Mix检测Rab3D的表达水平。PCR反应在ABI Step One Plus系统上进行,反应条件:95℃、10 min为预变性阶段条件;95℃、12 s,62℃、40 s,共40个循环的扩增阶段条件;95℃15 s,60℃30 s,95℃15 s为溶解曲线阶段条件。以U6或GAPDH作为内参,2-ΔΔCT法计算miR-125a-5p和Rab3D的相对表达量[9]。扩增使用的引物见表1。