《表1 基因U6、miR-125a-5p和STAT3的引物序列》

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《miR-125a-5p通过靶向STAT3抑制肾癌细胞增殖和侵袭及其可能机制》

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采用TRIzol法提取组织标本或细胞中总RNA，经紫外分光光度计定量，并计算D260/D280分析其纯度；将提取的RNA逆转录为cDNA，混入荧光染料SYBR Green I进行qPCR，反应条件为94℃预变性5min、94℃变性30 s、55℃退火30 s、72℃延伸60 s，共30个循环，最后72℃下扩展10 min采集荧光信号；每个样本做3次重复，以U6为内参，采用2–ΔΔCT法计算miR-125a-5p、信号转导和转录激活因子3（signal transducer and activator of transcription-3，STAT3）mRNA的相对表达量，其引物序列见表1。