《表1 引物序列:miR-181a-5p靶向LRRFIP1基因介导高糖诱导的肾小球系膜细胞凋亡及炎症反应》

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《miR-181a-5p靶向LRRFIP1基因介导高糖诱导的肾小球系膜细胞凋亡及炎症反应》


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采用Trizol法提取细胞中的总RNA,应用Nanodrop2000c超微量分光光度计检测RNA浓度,按照反转录试剂盒说明书将RNA反转录为cDNA。miR-181a-5p、LRRFIP1引物见下表,引物由上海生工生物工程股份有限公司设计合成。以cDNA为模板进行qRT-PCR反应,参照试剂盒配置反应体系,反应条件:95℃预变性60 s,95℃变性60 s,56℃退火30 s,72℃延伸30 s,共40次循环。miR-181a-5p以U6为内参,LRRFIP1以β-actin为内参,采用2-ΔΔCt法计算miR-181a-5p、LRRFIP1 mRNA相对表达量。见表1。