《表1 引物序列:敲低circ_0001273抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭的研究》

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《敲低circ_0001273抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭的研究》


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提取总RNA,在无RNA酶的PCR管中加入1μg总RNA及11μL纯水,混匀后至于85℃保温5 min,使RNA变性,随后立即置于冰上,以防RNA复性,随后在此PCR管中加入0.5μL Oligo(dT)、0.5μL Random primer、2μL 10 mM dNTP、RNase inhibitor、5×buffer及M-MLV,混匀后置于30℃保温10 min,置于42℃60 min,置于85℃10 min。逆转录完成后,在PCR仪上设置反应条件为50℃2 min、95℃2 min、95℃15 s、60℃32 s、40个循环,并于60℃~95℃分析熔解曲线。引物序列如表1所示。