《表1 引物序列：下调miR-34a表达逆转七氟醚对食管癌KYSE-150细胞增殖及侵袭的抑制作用》

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《下调miR-34a表达逆转七氟醚对食管癌KYSE-150细胞增殖及侵袭的抑制作用》

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收集对数生长期的KYSE-150细胞（1×105个），加入体积百分浓度为1.7%、3.4%和5.1%的七氟醚分别处理6 h后，或经5.1%七氟醚分别诱导KYSE-150细胞2、4和6 h后，收集细胞，采用TRIzol试剂提取KYSE-150细胞中总RNA，并反转录为cDNA；实验流程参阅TRIzol试剂及反转录试剂盒操作说明。以U6作为内参照，进行实时荧光定量PCR扩增。PCR扩增条件为95℃预变性5 min；95℃变性15 s、60℃退火60 s，72℃延伸30 s；共40个循环。（miR-34a及U6的引物序列见表1）。以2-ΔΔCt值表示目的miRNA的相对表达水平。实验重复3次。