《表1 实时荧光定量引物：七氟醚对乳腺癌细胞NF-κB活性及MMP-2、MMP-9表达的影响》

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《七氟醚对乳腺癌细胞NF-κB活性及MMP-2、MMP-9表达的影响》

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收集细胞，利用Trizol法提取各试验组细胞的总RNA，提取的总RNA利用PrimeScriptTMRT reagent Kit参考说明书反转录为cDNA，利用Mastercycler ep realplex PCR仪检测NF-κB、MMP-2、MMP-9 mRNA的表达情况，结果采用2-ΔΔCt法计算mRNA相对表达。反应体系25μl，包括总cDNA1μl，上下游引物各0.5μl，SYBR 12.5μl和无RNA酶水10.5μl，上述反应体系均需轻弹混匀，然后瞬时离心将液体离至管底，SYBR需注意避光添加。反应程序采用两步法，退货温度60℃，设置溶解曲线。引物序列见表1。