《表1 各基因引物序列：STAT5基因沉默及过表达对人乳腺癌细胞株紫杉醇耐药性的影响及其机制》

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《STAT5基因沉默及过表达对人乳腺癌细胞株紫杉醇耐药性的影响及其机制》

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采用qPCR法。用RNA提取试剂盒提取细胞总RNA：取200μL细胞沉淀加入RLT溶液中，依次加入β-巯基乙醇、70%乙醇、RW1、RPE等，具体步骤按试剂盒说明书进行。以提取的总RNA为模板，进行qPCR扩增。引物序列见表1。引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。反应体系：SYBR RT-PCR Buffer10μL，RT Enzyme Mix 0.4μL，EX TaqHS 0.4μL，ROX Reference Dye（50×）0.4μL，Forward Primer(10μmol/L）0.4μL，Reverse Primer（10μmol/L）0.4μL，Total RNA 1μL。反应条件：42℃5 min；95℃12 s；95℃5 s，60℃30 s，共40个循环；绘制熔解曲线。2-ΔΔCT法计算各基因的相对转录水平。