《表1 引物序列：鹿茸多肽对软骨终板细胞基质蛋白及其降解酶基因表达的影响》

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《鹿茸多肽对软骨终板细胞基质蛋白及其降解酶基因表达的影响》

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按照试剂说明书配好反应体系，上机进行实时PCR扩增和检测。引物序列见表1，反应体系为20μL总体系，具体是2×Mix SYBR Green I荧光反应液10μL，上下游引物（10pmol/L）各0.25μL，样品模板1μL，用灭菌水补足20μL体系。反应条件95℃2min预变性，循环内95℃30s变性，60℃退火35s，PCR反应设置40个循环，并在每个循环延伸末端点收集荧光信号，绘制扩增曲线；40个循环后设置（95℃15s，60℃30s，95℃15s）反应步骤，并且对60~95℃升温整个过程全程荧光信号收集，绘制融解曲线。每个样本重复3个复孔，Bio-Rad CFX96Manager软件分析，GraphPad软件作图。