《表1 mRNA引物序列:软骨寡聚基质蛋白在颞下颌关节滑膜软骨瘤病中的表达》

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《软骨寡聚基质蛋白在颞下颌关节滑膜软骨瘤病中的表达》


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采用实时荧光定量PCR检测并比较TMJSC与正常滑膜组织中COMP、TGF-β3、TGF-β1及BMP-2mRNA表达情况,引物序列见表1,引物购于生工生物工程(上海)股份有限公司。选取RNA Later中保存完好的TMJSC组织12例,正常滑膜组织3例,样本经组织破碎、分层、沉淀、4℃12 000 r/min离心、清洗、溶解等步骤提取组织mRNA,并检测其浓度;经银质梯度PCR仪逆转录为c DNA;采用实时荧光定量PCR仪定量分析扩增产物,PCR条件为:预变性95℃,5 min;变性94℃,30 s;目的基因均退火60℃,30 s(内参GAPDH退火55℃,30 s);延伸72℃,1 min;变性、退火、延伸共40个循环,72℃,6 min。