《表1 引物序列:类风湿关节炎患者膝关节滑膜组织中Sirt2和Sirt3 mRNA表达及意义》
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《类风湿关节炎患者膝关节滑膜组织中Sirt2和Sirt3 mRNA表达及意义》
取2组膝关节滑膜组织,液氮下研磨,采用Trizol法提取总RNA,比色杯测RNA浓度,用2μL RNA进行反转录,反转录反应体系:共20μL,包括RNA样本2μg,AccuRT反应混合物(4×)2μL,去RNA酶水加至8μL,室温放置5min,AccuRT反应终止液(5×)2μL,5×All-In-One RT主混合物4μL,去RNA酶水6μL。反转录反应条件:25℃10min,42℃15min,85℃5min。PCR反应体系:EvaGreen 2×qPCR主混合物5μL,上游引物(10μmol/L)0.3μL,下游引物(10μmol/L)0.3μL,DNA样本≤500ng/反应,去RNA酶水加至10μL。PCR反应条件:95℃10min,95℃15s,60℃60s,40个循环。采用2-△△Ct法,设对照组表达为1,算出倍数。引物序列见表1。
图表编号 | XD0034133200 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.02.10 |
作者 | 陈祝锋、王晓艳 |
绘制单位 | 空军军医大学第二附属医院骨科、哈尔滨医科大学第二附属医院风湿免疫科 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |