《表2 引物基因序列：基于生物信息学验证CCR5参与类风湿关节炎发生发展的遗传学和组织学证据》

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《基于生物信息学验证CCR5参与类风湿关节炎发生发展的遗传学和组织学证据》

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各组滑膜组织用Trizol法提取总RNA，并按照逆转录试剂盒说明书将RNA逆转录为c DNA，再以GAPDH为内参基因，将c DNA进行PCR扩增，反应条件：94℃预变性10 min，94℃变性30 s，54℃退火30 s，72℃延伸60 s，30个循环，引物序列见表2。滑膜组织加入蛋白裂解液提取蛋白，再利用10%SDS分离胶与浓缩胶电泳分离、转膜，滴加稀释的一抗兔抗鼠CCR5，4℃孵育过夜；加入二抗37℃振荡孵育l h后用化学发光仪检测。