《表2 引物序列信息:蒙脱石、枯草芽孢杆菌及其互作对蛋鸡血浆激素含量、卵巢繁殖相关基因表达和肠道微生物的影响》

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《蒙脱石、枯草芽孢杆菌及其互作对蛋鸡血浆激素含量、卵巢繁殖相关基因表达和肠道微生物的影响》


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称取每份十二指肠和回肠内容物样品(200±10)mg置于2 mL离心管中,采用粪便基因组DNA提取试剂盒(DP328,天根,北京)提取细菌DNA,并用蛋白核酸测定仪和0.8%琼脂糖凝胶电泳检测DNA浓度和质量。DNA样品浓度经3次检测后取其平均值,随后将所有样品浓度统一稀释至100 ng/μL。使用荧光定量PCR试剂盒进行PCR扩增,反应体系和反应程序同1.5.2。引物采用Primers软件设计,由上海生工生物有限公司合成,引物序列见表2。以总菌为参比基因,采用2-ΔΔCt法计算目的细菌的相对含量[9,11]。