《表1 基因的引物序列：枯草芽孢杆菌RZ001对乳鼠肠道发育、肠道菌群和Wnt信号通路相关基因表达的影响》

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《枯草芽孢杆菌RZ001对乳鼠肠道发育、肠道菌群和Wnt信号通路相关基因表达的影响》

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小肠组织经液氮研磨之后采用Trizol法提取总RNA，并用M-MLV逆转录酶将RNA逆转录成2μg cDNA，逆转录体系为25μL。实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA相对表达量。PCR扩增体系20μL:qPCR master mix 10μL，50×ROX0.4μL，上、下游引物各0.5μL，cDNA模板1μL，无菌蒸馏水7.6μL。PCR反应条件：95℃预变性2 min；95℃变性10 s，60℃退火和延伸30 s，40个循环；95℃1 min，55℃1 min，95℃15 s绘制熔解曲线。以GAPDH作为参考基因，2-ΔΔCt法计算目的基因mRNA相对表达量。目的基因的引物序列见表1。