《表1 引物序列：当归拈痛汤调控Fas/caspase-8通路促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞凋亡》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《当归拈痛汤调控Fas/caspase-8通路促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞凋亡》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

Fas、FADD、caspase-8、caspase-3 mRNA表达水平按照2.4实验分组给药干预48 h，每孔加入1 mL Trizol，反复吹打数次移至EP管，室温静置5 min。往离心管中加入200μL氯仿，震荡混匀15 s，室温静置3 min后，4℃12000 g离心15 min。吸取含有总RNA的最上层无色水相至新的EP管，轻轻吸取约500μL，加入500μL的异丙醇，上下颠倒均匀，室温沉淀10 min后，4℃，12 000 g离心10 min。弃去上清液，管壁可见细小的白色沉淀。加入1 mL 75%乙醇，颠倒混匀，使沉淀悬浮。4℃，7500 g离心5 min，尽量吸除上清液后，打开盖子，室温晾干。待RNA略干后，加入10μL DEPC水，充分溶解RNA。利用紫外分光光度仪上测定RNA样品的质量与浓度，A260/A280比值在1.8～2.1范围内表明总RNA纯度较好。在RT-PCR扩增仪上进行c DNA反转录，先42℃2min去除基因组DNA；进行逆转录，反应条件37℃15min，85℃5 s，反应结束后4℃，保温。在实时荧光PCR仪上进行PCR反应，反应条件为95℃预变性30 s，95℃10 s，60℃30 s，共扩增40个循环，95℃15 s，60℃60 s，95℃15 s进行溶解曲线分析。单峰溶解曲线表示扩增产物单一，无非特异性扩增产物。反应结束后由电脑软件自动分析并计算出结果。采用2-ΔΔCt法计算mRNA相对表达量。引物由擎科生物科技有限公司合成见表1。